Ани Бакалова учи в Католическото девическо училище "Санта Мария", София (по-късно сграда на ВИФ), завършва СО 120 у-ще "Г. С. Раковски" и 22 гимназия "Г. С. Раковски", София.

Завършва ВИТИЗ "Кръстьо Сарафов" със специалност актьорско майсторство в класа на професор Кръстьо Мирски през 1961.

През периода 1961-1964 г. работи в Държавен театър Бургас.
През периода 1964-1966 г. работи в Народен театър "Иван Вазов".

От 1966 г. работи в "Сълза и смях". Тя е един от съоснователите на театър "Сълза и смях".

Бакалова участва и в озвучаването на филми и радио пиеси. Един от последните ѝ дублирани филми е "Историята на Исус за деца".

Член е на САБ от 1961 г. Заслужил артист (1983 г.). През 2009 г. е отличена с най-високото отличие на Министерството на културата "Златен век". През 2013 г. за големите ѝ заслуги към българския театър, кино и култура, във връзка със 70-годишнината ѝ и 50 години на нейната сценична и филмова кариера е наградена с орден "Св. св. Кирил и Методий".